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dc.contributor.advisorMaría Florencia Kronberg
dc.contributor.advisorSusana Di Bernardo de Passeron
dc.contributor.authorDíaz Ludovico, Ivo
dc.date.accessioned2014-04-14T18:12:29Z
dc.date.available2014-04-14T18:12:29Z
dc.date.issued2013
dc.identifier.urihttp://repositorio.ub.edu.ar/handle/123456789/2444
dc.descriptionThe cAMP-dependent protein kinase (PKA) is an enzyme that engages the transference of a phosphate group of ATP to its target protein; its activity is regulated by intracellular cAMP concentration. In Yarrowia lipolytica, a dimorphic fungus of biotechnological interest, we found that PKA is involved in morphogenesis, cell metabolism and adaptation to stress conditions. The regulatory and catalytic subunits are encoded by sole genes, RKA1 and TPK1, respectively. It was possible to identify three proteins: the self regulatory subunit of PKA, Rka1, a protein with homology to Saccharomyces cerevisiae ubiquinone biosynthesis monooxygenase CoQ6 and the translational elongation factor EF1-α.es_ES
dc.description.abstractLa proteína quinasa dependiente de AMPc (PKA) es una enzima que se encarga de transferir grupos fosfato de un ATP a sus proteínas diana; su actividad se encuentra regulada por la concentración intracelular de AMPc. En Yarrowia lipolytica, un hongo dimórfico de interés biotecnológico, se encontró que la PKA está involucrada en la morfogénesis, en el metabolismo celular y en la adaptación a condiciones de estrés, y que las subunidades regulatoria y catalítica de la misma se encuentran codificadas por genes únicos: RKA1 y TPK1 respectivamente. En este trabajo se pusieron a punto diversas técnicas de proteómica y biología molecular con el fin de identificar posibles proteínas diana de la PKA de Y. lipolytica. La estrategia utilizada se basó en la comparación de proteínas inmunoenriquecidas con un anticuerpo anti-fosfoSustrato de la PKA de una cepa sin actividad PKA (∆tpk1) y una salvaje. En primera instancia se estandarizó el protocolo de unión entre la resina proteína A-sefarosa y un anticuerpo anti-fosfoSustrato de la PKA, con la cual, en segundo lugar, se enriquecieron las fosfoproteínas provenientes de la cepa salvaje y la mutante, resolviéndose posteriormente por electroforesis bidimensional 2D-PAGE. Por último, se seleccionaron los spots diferencialmente encontrados en la cepa salvaje y se identificaron las proteínas por espectrometría de masas MALDI-TOF. Así, se pudieron identificar 3 proteínas: la propia subunidad regulatoria de la PKA, Rka1; una proteína putativa con homología con la monooxigenasa de la biosíntesis de ubiquinona Coq6 de Saccharomyces cerevisiae, y el factor de elongación traduccional EF1-αes_ES
dc.language.isoeses_ES
dc.publisher.EditorUniversidad de Belgrano. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Carrera Licenciatura de Ciencias Bológicas
dc.relation.ispartofseriesLas tesinas de Belgrano;N° 602
dc.subjecttransición levadura-micelioes_ES
dc.subjectyeast-mycelium transitiones_ES
dc.subjectdimorfismo fúngicoes_ES
dc.subjectfungal dimorphismes_ES
dc.subjectfosfoproteomaes_ES
dc.subjectphosphoproteomees_ES
dc.titleIdentificación de sustratos fosforilados por la PKA de Yarrowia lipolytica mediante técnicas de proteómica comparativaes_ES
dc.typeThesises_ES


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