Estudios bioquímicos de las isoformas Tpk1p y Tpk2p de la PKA de Candida albicans
Abstract
Trabajos previos de nuestro laboratorio y de otros han demostrado que la vía de señalización celular
AMPc/PKA está involucrada en la respuesta de C. albicans a alguno de los factores ambientales que
controlan su morfología y que la actividad enzimática de las dos isoformas presentes de PKA (Tpk1p y
Tpk2p) tienen un rol positivo en el proceso. Trabajando con cepas nulas para los genes de una u otra
isoforma surgieron resultados inesperados en el sentido en que de las dos cepas mutantes la que presenta
una actividad catalítica mucho menor es la que muestra una mayor capacidad germinativa medida como
formación de hifas verdaderas. Estos antecedentes señalaron la necesidad de profundizar en la caracterización
bioquímica de las isoformas de la PKA con el objeto de avanzar en la comprensión de los mecanismos
bioquímicos subyacentes en el proceso morfogenético.
En este trabajo de Tesina se comenzó el estudio de algunas de las propiedades cinéticas de las isoformas
Tpk1p y Tpk2p y se inició el estudio del estado de fosforilación de la subunidad regulatoria. Como
primer paso de este segundo item se puso a punto el ensayo de desfosforilación de proteínas con l fosfatasa.