Actividad antiherpética in vitro de brassinosteroides obtenidos por síntesis química

Abstract

Los brassinosteroides son un grupo de esteroides que se encuentran ampliamente distribuídos en las plantas y son esenciales para su crecimiento y desarrollo. Estos compuestos presentan un uso potencial en agricultura por su capacidad de mejorar el rendimiento y calidad del cultivo. Los brassinosteroides naturales identificados hasta ahora y sus análogos sintéticos tienen en común un esqueleto 5-?-colestano y sus variaciones estructurales se obtienen por el tipo, posición y estereoquímica de los grupos funcionales presentes en el esqueleto y la cadena lateral. Hasta hace 4 años, los brassinosteroides no habían sido informados como antivirales. En este trabajo se realiza una recopilación y análisis de información acerca de las propiedades antiherpéticas in vitro de brassinosteroides obtenidos por síntesis química basándose en investigaciones recientes. En un primer estudio, se evaluó la actividad antiherpética de 12 derivados brassinosteroides (1a - 6b) frente a las cepas F y B 2006 del virus herpes simplex tipo 1 (HSV-1) utilizando el método de reducción del número de placas virales para determinar la CE50 (concentración efectiva antiviral 50%). Los compuestos resultaron ser igualmente activos contra ambas cepas de HSV-1. En un trabajo posterior, se investigaron otros 26 derivados brassinosteroides (7 - 32) contra los virus HSV-1 (cepa F) y HSV-2 (cepa G) utilizando el método de inhibición del rendimiento viral para determinar la actividad antiherpética. Además, se determinó la actividad anti-HSV-1 de los derivados 1a - 6b y anti-HSV-2 del compuesto 6b por este último método. El estigmasterol, esterol natural a partir del cual se sintetizaron los brassinosteroides ensayados, y el aciclovir se incluyeron como controles. La CC50 (concentración citotóxica 50%) se determinó utilizando el método colorimétrico del MTT en cultivos celulares en estado estacionario. Con el cociente de los valores de CC50 y CE50 se calculó el índice de selectividad (IS). De los compuestos evaluados, los brassinosteroides 6b, 7b y 12b resultaron ser en general los más activos con valores de IS de 100, 80 y 109 para HSV-1 y 71, 40 y 27 para HSV-2, respectivamente. Los resultados obtenidos en estos trabajos permitieron realizar un análisis de relación estructura - actividad (REA) para los distintos brassinosteroides frente a los virus HSV-1 y HSV-2. El efecto antiviral de los derivados brassinosteroides ensayados no se debió a una inactivación directa, mostrando que un paso de la multiplicación viral estaba siendo afectado. Con respecto al modo de acción de los brassinosteroides, los experimentos de adsorción viral, penetración viral y agregado del compuesto 6b a distintos tiempos post-infección con HSV-1 sugieren que un estadío tardío en la multiplicación de HSV-1 estaría siendo afectado, indicando que el mecanismo de acción sería diferente del correspondiente al aciclovir, droga activa contra HSV utilizada en la clínica. Los brassinosteroides evaluados en este estudio representan una nueva clase de compuestos que resultó ser moderadamente activa frente a HSV-1 y HSV-2, en concentraciones que no fueron tóxicas para las células huésped. A partir de los estudios de relación estructura-actividad (REA) y relación cuantitativa estructura-actividad (RCEA), se buscará desarrollar una nueva clase de inhibidores potentes y selectivos de HSV.